ট্রাইফ্লুরিডিন একটি নিউক্লিওসাইড অ্যানালগ অ্যান্টিভাইরাল এজেন্ট যা কোষের অভ্যন্তরে তার সক্রিয় ট্রাইফসফেট ফর্মে ফসফরিলেটেড হয়। এই সক্রিয় মেটাবোলাইট প্রতিযোগিতামূলকভাবে ভাইরাল থাইমিডিলেট সিন্থেসিস কে বাধা দেয়, যা হারপিস সিমপ্লেক্স ভাইরাস দ্বারা সংক্রামিত কোষে ডিএনএ সংশ্লেষণ ব্যাহত করে। এটি ভাইরাল ডিএনএ-তেও অন্তর্ভুক্ত হয়, যার ফলে ত্রুটিপূর্ণ ডিএনএ স্ট্র্যান্ড তৈরি হয় এবং ভাইরাল প্রতিলিপি প্রতিরোধ করে। অনকোলজিতে, ট্রাইফ্লুরিডিন একটি অ্যান্টিমেটাবোলাইট হিসাবে কাজ করে, যা ডিএনএ-তে একত্রিত হয় এবং টিউমার কোষের বিস্তারে হস্তক্ষেপ করে।